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液相色譜儀的使用和維護(hù)保養(yǎng)

時(shí)間:2017-07-20瀏覽:3133次

液相色譜儀也叫高壓液相色譜、高速液相色譜、高分離度液相色譜等,它是在經(jīng)典液相色譜法的基礎(chǔ)上,于60年代后期引入了氣相色譜理論而迅速發(fā)展起來的。它與經(jīng)典液相色譜法的區(qū)別是填料顆粒小而均勻,小顆粒具有高柱效,但會引起高阻力,需用高壓輸送流動相,故又稱高壓液相色譜。又因分析速度快而稱為高速液相色譜。

由于液相色譜分析技術(shù)涉及的樣品種類繁多、樣品組成及其濃度復(fù)雜,樣品物理形態(tài)多變,對液相色譜儀的正常分析測定造成一些干擾因素,如果不注意儀器的維護(hù)和保養(yǎng),會對日常的分析測定帶采不便,所以需要對儀器的使用以及維護(hù)要做一些了解才能熟練掌握這種分析技術(shù)。

液相色譜儀的操作過程:
 
1.翻開HPLC工作站(包含計(jì)算機(jī)軟件和色譜儀),銜接好活動相管道,銜接檢測體系。
2.對抽濾后的活動相進(jìn)行超聲脫氣10-20分鐘。
3.過濾活動相,根據(jù)需求挑選不一樣的濾膜。
4進(jìn)入HPLC操控界面主菜單,manual,進(jìn)入手動菜單。
5.有一段時(shí)刻沒用,或許換了新的活動相,需求先沖刷泵和進(jìn)樣閥。沖刷泵,直接在泵的出水口,用針頭抽取。沖刷進(jìn)樣閥,需求在manual菜單下,先purge,再start,沖刷時(shí)速度不要超越10ml/min。
6.調(diào)理流量,初度運(yùn)用新的活動相,能夠先試一下壓力,流速越大,壓力越大,通常不要超越2000。injure,選用適宜的流速,on,走基線,調(diào)查基線的狀況。
7.規(guī)劃走樣辦法。file,選擇select?users?and?methods,能夠選擇現(xiàn)有的各種走樣辦法。若需樹立一個新的辦法,new?method。選擇需求的配件,包含進(jìn)樣閥,泵,檢測器等,根據(jù)需求而不一樣。選完后,protocol。一個完整的走樣辦法需求包含:a.進(jìn)樣前的穩(wěn)流,通常2-5分鐘;b.基線歸零;c.進(jìn)樣閥的loading-inject變換;d.走樣時(shí)刻,隨不一樣的樣品而不一樣。
8.進(jìn)樣和進(jìn)樣后操作。選定走樣辦法,start。進(jìn)樣,一切的樣品均需過濾。辦法走完后,postrun,可記載數(shù)據(jù)和做符號等。悉數(shù)樣品走完后,再用上面的辦法走一段基線,洗掉剩余物。
9.關(guān)機(jī)時(shí),先關(guān)計(jì)算機(jī),再關(guān)液相色譜儀。

液相色譜儀操作注意事項(xiàng):
 
1、液相色譜儀的流動相應(yīng)采用色譜純?nèi)軇詽M足要求、避免損壞色譜柱
2、待分析的樣品必須溶解澄清、過濾,以避免堵塞、損壞色譜柱;
3、液相色譜儀流動相需經(jīng)過濾、除氣后方可使用;
4、嚴(yán)禁使用有污染的水等沖洗色譜柱,避免將互不相溶的溶劑一同進(jìn)入泵內(nèi);
5、液相色譜儀分析完成后,須注意及時(shí)清洗色譜柱和檢測器的比色池。

 

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